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人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)酶联免疫试剂盒

发表时间:2025-07-17

人血管内皮细胞粘附分子 1(VCAM-1/CD106)酶联免疫试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、组织、细胞上清等样本中 VCAM-1 的含量。以下是详细介绍:

检测原理:采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人 VCAM-1 抗体的酶标板孔中,依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体,经过温育并洗涤后,用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色,颜色深浅与样品中的 VCAM-1 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),可计算样品浓度。

试剂盒组分:通常包含 96 孔或 48 孔的微孔酶标板、标准品(0.3mL×6 管)、样本稀释液、检测抗体 - HRP、20× 洗涤缓冲液、底物 A、底物 B、终止液、封板膜 2 张、说明书和自封袋。

样本类型及处理:可检测血清、血浆、组织、细胞上清等样本。血清标本需室温放置 2 小时或 4℃过夜后,于 1000g 离心 20 分钟取上清;血浆可用 EDTA 或肝素抗凝,采集后 30 分钟内于 2-8℃、1000g 离心 20 分钟取上清;细胞培养物上清直接 1000g 离心 20 分钟取上清即可。所有样本若不能立即检测,可放于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。

主要仪器:酶标仪、移液器及枪头、蒸馏水或去离子水、水平轨道微孔板振荡器、计时器、微孔板洗板机等。

操作流程:先将试剂盒从冷藏环境中取出,在室温平衡 20min。然后设置标准品孔和样本孔,加入相应的标准品和待测样本,再加入 HRP 标记的检测抗体,37℃温育 60min。之后进行洗板,加入底物 A、B 避光孵育 15min,最后加入终止液,15min 内于 450nm 波长处测定 OD 值,根据标准曲线计算样品中 VCAM-1 的浓度。

性能指标:样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值通常在 0.95 以上。批内变异系数一般小于 10%,批间变异系数小于 15%。

保存条件及有效期:需在 2-8℃条件下保存,有效期一般为 6 个月。



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