人过氧化还原酶6(PRDX6)ELISA试剂盒
发表时间:2025-07-17
检测原理:通常采用双抗体夹心法。将捕获抗体包被于酶标板上,样本及标准品中的 PRDX6 与捕获抗体结合,再加入生物素化的检测抗体,它会与 PRDX6 结合,随后加入亲和素 - 生物素 - 过氧化物酶复合物(SABC)与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物。加入 TMB 显色底物后,若反应孔中有 PRDX6 则显蓝色,加入终止液后变为黄色。通过酶标仪在 450nm 处测定吸光度(OD)值,PRDX6 浓度与 OD 值呈正比,可通过标准曲线计算出标本中 PRDX6 的浓度。
试剂盒组分:以常见的 96T 规格为例,一般包含预包被酶标板 8×12 条、PRDX6 标准品 2 支 ×100μL、100× 生物素化抗体 1 支 ×120μL、浓缩 ABC 复合物 1 支 ×120μL、20× 浓缩稀释液 1 支 ×30mL、TMB 显色底物 1 支 ×10mL、终止液 1 支 ×10mL、20× 浓缩洗涤液 1 支 ×30mL、封板胶纸 2 张以及产品说明书 1 份。
样本类型:血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
主要仪器:酶标仪(包含 450nm 测定波长,建议配置 600 - 680nm 校正波长,采用双波长检测)、移液器及枪头、蒸馏水或去离子水、水平轨道微孔板振荡器、计时器、微孔板洗板机等。
操作流程:大致包括标准品稀释、加样(标准品孔、待测样品孔、空白孔),37℃温育,洗涤液稀释与洗涤,加酶标试剂,再次温育与洗涤,加底物避光显色,加终止液终止反应,最后用酶标仪在 450nm 波长处测定 OD 值,通过标准曲线计算样品中 PRDX6 的浓度。
性能指标:不同试剂盒有所差异,一般检测限可达 15.625 - 1000pg/ml,具有较高的灵敏度和较好的重复性,板内、板间变异系数通常小于 15%。
保存条件及有效期:一般应在 2 - 8℃低温、避光、防潮保存,保质期通常为 6 个月。未用完的酶标板密封干燥保存可于 2 - 8℃储存至多 1 个月,部分试剂如标准品、生物素化抗体等剩余的可置于 - 20℃储存。